细菌学诊断在猪病临床中的应用

导读

近年来，随着规模化养猪业的发展、频繁的引种，各类疾病尤其是猪呼吸道疾病日渐增多，已经成为影响养猪生产的一大危害。引起猪呼吸道细菌性疾病的病原菌主要有副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌、支气管败血性波氏杆菌、沙门氏菌、链球菌等

细菌学诊断

在猪病临床中的应用

在兽医临床上，某些人畜共用药和抗菌药以添加剂的形式大量使用、抗菌药滥用和抗菌药的不正当使用对畜禽造成极大的危害，主要表现在4方面：

造成的危害

①在药物选择压力下，使细菌很快产生耐药性，目前，耐药水平一再提高，单药耐药逐渐向多药耐药发展；

②使用不当的药物会损害畜禽器官，抗菌药在杀菌的同时，也会影响肝、肾脏功能，胃肠道反应及引起再生障碍性贫血等；

③导致多重感染，在健康畜禽的口腔、呼吸道、肠道都有正常菌群存在，以维持微生态平衡，如果长期使用广谱抗菌药物，则会打破这种平衡，未被抑制的细菌、真菌及外来菌可诱发新的感染；

④耐药菌株会通过质粒、转座子、噬菌体、整合子一基因盒系统将耐药性转移到其它非病原菌而使其产生耐药性，甚至传播给人类，加重防治人细菌性感染的难度药物的难度。

要克服用药的盲目性，就需要进行细菌学诊断，从临床病料中分离到真正的病原菌，进行药敏试验，以选择出合适的药物，并根据猪场的具体情况，合理选择抗菌药，才能降低用药成本、减少盲目性、更重要的是减少耐药菌株的出现。研究细菌性疾病的流行病学规律与特点，合理运用包括细菌分离培养、鉴定在内的细菌学诊断方法是制定有效预防(包括菌苗等的研制)、控制与管理措施提供依据的需要。

细菌学诊断的内容和流程

　

细菌学的诊断内容

细菌的形态学观察（通过染色镜检，观察细菌的大小、形态的排列方式等）

细菌分离和纯培养（根据临床资料，选择合适的培养基，进行真正致病菌的分离，进而获得细菌的纯培养物）

细菌鉴定（染色特性、生化试验等）

药敏试验（筛选敏感药物）

血清学诊断（利用各种免疫学方法来测定细菌特异性抗原）

分子生物学诊断（PCR等方法对细菌基因组中的特异基因进行鉴定）

细菌学的诊断流程细菌学诊断样本的采集及送检原则

目前，兽医临床上常见的细菌感染大多为多重感染，要得到正确的诊断结果，必须遵循

一定的样本的采集和送检原则。

采集和送检原则

(1)样本采集时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染；

(2)　根据致病菌在不同病期的体内分布和排出部位，采取相应的样本；

(3)　应在使用抗菌药物前采集样本；

(4)　尽可能采集病变明显部位的材料；

(5)　样本必须新鲜，采集后尽快送检；

(6)　送检过程中要采取适当的保存方式，尽量避免冰冻；

(7)　样本做好标记，详细填写化验单，保证各环节的准确无误

细菌学诊断的应用

副猪嗜血杆菌病

副猪嗜血杆菌是猪上呼吸道的常在微生物，是一种条件性致病菌，可以并发或继发于蓝耳病、伪狂犬病、细小病毒病、圆环病毒病、猪瘟等疫病，使疫情复杂化，经济损失加重。副猪嗜血杆菌感染与猪胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌等病原体一起已经共同成为当今养猪场新的麻烦问题之一。 　　

副猪嗜血杆菌现有15个血清型(1～15)。值得一提的是，尽管如此，还是有大量的分离株不能被分型。该病可通过病史调查、流行病学、临床症状及剖检变化等做出初步诊断，细菌的分离培养对确诊是必要的，但是此菌对生长环境和营养要求极为苛刻，而且病料超过24小时之后就很难分离到该菌。应无菌采取胸腹腔积水、心包积液、心血、关节液和脑组织等病料进行细菌分离和鉴定。使用商品疫苗或自家疫苗可以控制副猪嗜血杆菌感染，但是血清型的多样性以及占很大比例的不能分型的菌株影响了对具有高效交叉保护力疫苗的研制。自家灭活苗的保护更有针对性，但保证分离到的副猪嗜血杆菌是真正的致病菌或主要的致病血清型。因此，要在养猪场制定合理的防控措施，就必需借助于正确的细菌学诊断结果。

传染性胸膜肺炎放线杆菌病

该病是当前危害集约化养猪业的主要呼吸道疾病的病原之一。近几年以来，该病在我国呈暴发性流行，造成巨大的经济损失。建立科学、快速、准确的诊断方法对于净化本病有重要的意义。

到目前为止，胸膜肺炎放线杆菌已发现有15个血清型，血清型1、9、11，3、6、8，4、7之间有交叉反应，我国流行的血清型为1、2、3、5、7、10等型，以1、3、7型为主，且主要血清型间缺乏交叉免疫性。这给本病的诊断及疫苗防治带来困难。因此，筛选特异性药物和自家苗就成为防控本病的最有效措施。在临床上进行细菌分离鉴定是防控的前提。可从病死猪的鼻腔分泌物、支气管及肺部病变取样分离培养，可获得胸膜肺炎放线杆菌的纯培养；再进行病原体形态学检查和生化实验，以鉴定病原；然后进行血清学鉴定，以确定其血清型。

猪链球菌病

链球菌病是一种人兽共患传染病。在猪常发生化脓性淋巴结炎、败血症、脑膜炎及关节炎。分布很广，发病率较高，败血症型和脑膜脑炎型的病死率较高，对养猪业的发展有较大的威胁。其病原体为多种溶血性链球菌。猪链球菌的病型较复杂，其流行情况无特征，需进行实验室检查才能确诊。

南昌金牧动物疾病研究中心在十几年的研究基础上，克服了主要致病菌难以分离培养等难题，拥有了副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和链球菌等兽医临床常见致病菌的分离、培养和鉴定技术，已为江西部分养猪场提供了准确的细菌分离、培养、鉴定和药敏试验结果，针对猪场防控相应疾病，起了很好的指导作用。

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